文献类型： 中文期刊

作者： 李永杰 ¹ ; 于永翔 ² ; 王印庚 ² ; 王春元 ² ; 刘定远 ² ; 张浩 ² ; 张正 ² ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部海水养殖病害防治重点实验室

关键词： 美人鱼发光杆菌美人鱼亚种;胞外产物;毒力特性;细胞毒性;许氏平鲲

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2022 年 62 卷 008 期

页码： 2995-3006

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacteriumdamselaesubsp.damselae,PDD)是一种可导致多种海洋生物患病的重要病原菌.本研究以从我国海水养殖环境中分离的具有强磷脂酶活性、强溶血性表型且具有高致病性的2株PDD菌株为研究对象,分析PDD菌株胞外产物(extracellular products,ECP)的致病性及细胞毒性,及其与菌株致病性表型的相关性.[方法]利用培养基平板法测定菌株PDD1605、PDD1608的ECP体外磷脂酶活性和溶血性;通过人工感染实验测定PDD1605和PDD1608活菌株及其ECP对许氏平鲲的致病性,并进行组织病理切片观察组织的病理损伤;通过向人胚肾细胞系HEK293T和小鼠成纤维细胞系MCFS等2种培养细胞中添加菌株PDD1605和PDD1608的ECP测定其对哺乳动物的细胞毒性.[结果]人工感染PDD1605和PDD1608活菌株对许氏平鲉均表现为高致病性,5×108 CFU/mL的菌液浓度24 h内受试鱼全部死亡;菌株PDD1605和PDD1608的ECP对许氏平鲉同样表现为高致病性,受试鱼的死亡曲线与感染活菌株的死亡曲线趋势基本一致;病理切片观察发现,感染ECP后许氏平鲉组织发生明显病变,主要表现为肠黏膜层组织崩解,心脏心肌炎性细胞浸润,肝脏血细胞和炎性细胞浸润,脾脏出现血铁蛋白沉积等;2株PDD菌株的ECP也具有体外强溶血活性和强磷脂酶活性,与菌株的毒力特性基本一致;2株PDD菌株的ECP对人胚肾细胞系HEK293T和小鼠成纤维细胞系MCFS具有细胞损伤作用,均使体外培养的细胞体积萎缩,形成了圆形细胞簇等退行性变化.[结论]通过体外测定溶血性、磷脂酶活性,许氏平鲲人工感染实验和病理切片观察,以及细胞毒性研究,证实2株高致病性PDD菌株的致病性表型与其ECP致病性表型和细胞毒性高度一致,从而说明ECP是高致病性PDD菌株的重要致病机制之一.