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农杆菌介导的芒果胶孢炭疽菌遗传转化及致病性缺陷突变体的筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 毕方铖 1 ; 戴宏芬 1 ; 孟祥春 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院果树研究所/农业部南亚热带果树生物学与遗传资源利用重点实验室

关键词： 胶孢炭疽菌;遗传转化;突变体;致病性

期刊名称： 热带农业科学

ISSN： 1009-2196

年卷期： 2014 年 34 卷 08 期

页码： 50-54

摘要： 构建含潮霉素抗性基因和GFP基因的双元载体p CAMBgfp,以其为转化载体用农杆菌EHA105介导的方法对芒果胶孢炭疽菌Cg-8菌株进行遗传转化,以潮霉素抗性和GFP荧光来筛选阳性转化子。然后,通过离体接种芒果叶片和果实观察病斑大小筛选致病性缺陷转化子。结果获得500个阳性转化子,转化效率为平均106个孢子可获得400个左右同时具有潮霉素抗性和GFP荧光的阳性转化子,且其经多次在无潮霉素的培养基上传代后能得到稳定遗传。随机挑选其中13个突变体进行PCR检测,均可扩增出潮霉素基因目的条带,致病性分析从中筛选得到8个致病性减弱或缺失突变体。

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