文献类型： 中文期刊

作者： 张毓露 ¹ ; 郝晓燕 ² ; 足木热木 ² ; 刘小利 ² ; 陈果 ² ; 陈勋基 ² ; 黄全生 ² ;

作者机构： 1.新疆农业大学农学院

2.新疆农业科学院核技术生物技术研究所

关键词： 玉米;基因;真核表达载体;重组质粒构建

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2012 年 49 卷 07 期

页码： 1190-1196

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]CDPK是一类依赖于Ca~(2+)而不依赖CaM及磷脂的蛋白激酶,或类钙调素结构域的蛋白激酶,是植物和低等动物所特有。研究为玉米CDPK基因家族在抗逆中的作用提供基础。[方法]构建玉米ZmCPK12基因真核表达载体是了解玉米中该基因功能的重要途径之一。实验利用RT-PCR技术扩增得到大小为1 533 bp的玉米ZmCPK12基因,经限制性内切酶SdI和NotI进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP-5N连接,获得重组真核表达质粒ZmCPK12-5N。[结果]通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒ZmCPK12-5N构建成功。制备酵母感受态,将重组质粒电击转入酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功。[结论]成功构建了玉米ZmCPK12基因真核表达载体,并且成功转化了酵母。