文献类型： 中文期刊
作者： 赵准 1 ; 胡文冉 1 ; 邵武奎 1 ; 黄全生 1 ;
作者机构： 1.新疆农业科学院核技术生物技术研究所
关键词： 棉花;GhCNGC8;基因克隆;表达分析;载体构建
期刊名称： 西北农业学报
ISSN： 1004-1389
年卷期： 2024 年 33 卷 012 期
页码： 2306-2314
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为明确环核苷酸门控离子通道蛋白基因GhCNCG8对棉花抗逆方面的作用。利用棉花叶片克隆获得该基因，生物信息学方法分析其理化性质、结构和进化关系，利用qRT-PCR（实时荧光定量）方法分析基因在黄萎病菌、干旱、盐胁迫以及激素诱导下GhCNCG8表达模式和组织表达特异性；构建该基因VIGS沉默载体，利用农杆菌介导方法转化该基因到棉花叶片中，荧光定量PCR方法检测沉默效率。以棉花叶片cDNA为模板成功克隆GhCNGC8基因，该基因开放阅读框为2 247 bp,编码748个氨基酸。进化树分析结果表明，陆地棉GhCNGC8基因与拟南芥AtCNGC8基因关系较近，多序列结果比对显示，GhCNGC8蛋白结构符合CNGCs家族蛋白结构特征。qRT-PCR结果表明，该基因对黄萎病、干旱、盐处理等胁迫及茉莉酸（JA）、水杨酸（SA）和双氧水（H2O2）处理均有一定程度的响应，qRT-PCR分析结果表明，GhCNGC8基因在根、茎、叶、花、萼片和苞片中均有表达，叶中表达量最高。构建该基因的VIGS沉默载体转化棉花，qRT-PCR结果表明，该基因在棉花中已经沉默，表达量相比对照植株降低70%左右，表明GhCNGC8沉默载体构建成功并在棉花体内正常运行，GhCNGC8可能在棉花抗逆方面发挥重要作用。
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