文献类型： 中文期刊
作者： 贺飞燕; 闫建俊; 白云凤; 冯瑞云; 张维锋;
关键词： 籽粒苋;AhPPDK;原核表达;酶活测定
期刊名称： 华北农学报
ISSN： 1000-7091
年卷期： 2017 年 32 卷 02 期
页码： 61-65
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了进一步探究籽粒苋丙酮酸磷酸双激酶(AhPPDK)蛋白的作用机制,构建了AhPPDK基因的原核表达载体,通过碱裂解提取质粒,经限制性内切酶酶切,采用1.0%琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物,选择正确表达的阳性重组子,将测序正确的重组质粒p EASY-E1-AhPPDK转化菌株Transetta(DE3);利用IPTG诱导蛋白表达。SDS-PAGE凝胶电泳分析表明,重组AhPPDK能在大肠杆菌Transset(DE3)中高效表达,表达的重组蛋白质分子量约为108 k Da,与预期分子量相符,且为可溶性蛋白。利用紫外分光光度法测量结果表明,原核表达的AhPPDK具有酶活性,且上清粗酶液活性高于沉淀粗酶液。研究结果可为进一步探明AhPPDK蛋白的作用机制和转基因利用奠定基础。
- 相关文献
[1]籽粒苋AhNAD-ME的序列特征与表达. 白云凤,聂江婷,张忠梁,李平,张维锋,闫建俊,冯瑞云,张耀. 2014
[2]籽粒苋苹果酸酶基因克隆及分析. 李平,白云凤,张维锋. 2010
[3]籽粒苋PEPC基因密码子使用偏性特征分析. 冯瑞云,闫建俊,侯雅静,雷梦林,郝雅萍,王慧杰,白云凤. 2018
[4]籽粒苋丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)基因的克隆及其特征分析. 冯瑞云,王原媛,闫建俊,雷梦林,郝雅萍,白云凤. 2019
[5]籽粒苋叶绿体基因组密码子偏好性分析. 冯瑞云,梅超,王慧杰,雷梦林,田翔,侯雅静. 2019
[6]籽粒苋优异性状相关基因的发掘利用研究进展. 贺飞燕,施俊凤,闫建俊,聂江婷,冯瑞云,张维锋,白云凤. 2015
[7]籽粒苋丙酮酸磷酸二激酶(PPDK)基因的密码子偏好性. 聂江婷,白云凤,贺飞燕,闫建俊,张维锋. 2014
[8]籽粒苋品种比较试验. 刘建宁,闫柳松,王运琦,吴欣明,张丽珍,张文淑. 2000
[9]籽粒苋苹果酸酶(NAD-ME)基因密码子偏好性分析. 李平,白云凤,冯瑞云,王原媛,张维锋. 2011
[10]籽粒苋光合特性与环境因子的相关和通径分析. 贺飞燕,闫建俊,张忠梁,冯瑞云,白云凤. 2016
[11]烟草天蛾几丁质酶的表达、纯化及多克隆抗体制备. 郝婵娟,柴宝峰,王伟,孙毅,梁爱华. 2005
[12]玉米磷酸丙糖异构酶基因的克隆及原核表达. 马芳芳,苏彦冰,张彬,李红英,韩渊怀. 2016
[13]苹果AFL1基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达. 张传义,孟玉平,孙海峰,曹秋芬. 2008
[14]枣树水通道蛋白基因生物信息学分析及原核表达载体的构建. 张洁,杨大威,孟玉平,赵玉云,曹秋芬. 2010
[15]TAT-EDAG融合蛋白的原核表达及其转导活性的研究. 周胜花,贺东昌,张李俊,陈立栋. 2006
[16]大肠杆菌O157:H7菌毛分子伴侣基因的克隆与表达. 牛晋国,秦晓冰,单虎,韩一超,周志江. 2009
[17]猪SsBHMT基因的原核表达及条件优化. 余爱丽,赵晋锋,张晏萌,张正,郭二虎. 2015
[18]枣树ZjAPX基因的原核表达. 张晓娟,郝子琪,杨大威,孟玉平,曹秋芬. 2012
作者其他论文 更多>>
-
马铃薯StDof5的克隆及表达分析
作者：梅显军;宋慧洋;李京昊;梅超;宋倩娜;冯瑞云;陈喜明
关键词：马铃薯;StDof5;载体构建;遗传转化
-
小麦芽期和苗期耐盐鉴定方法的适用性评价
作者：陈家婷;白欣;谷雨杰;张潇文;郭慧娟;常利芳;陈芳;张树伟;张晓军;李欣;冯瑞云;畅志坚;乔麟轶
关键词：小麦;耐盐鉴定;方法评价;芽期;苗期
-
马铃薯品种‘并薯6号’遗传转化体系的建立
作者：宋倩娜;梅超;霍利光;王慧杰;冯瑞云
关键词：马铃薯;农杆菌介导的转化;植物激素;遗传转化体系
-
马铃薯品种'并薯6号'遗传转化体系的建立
作者：宋倩娜;梅超;霍利光;王慧杰;冯瑞云
关键词：马铃薯;农杆菌介导的转化;植物激素;遗传转化体系
-
山西省冬小麦地方品种形态特征和生物学特性的遗传多样性分析
作者：雷梦林;刘霞;冯瑞云;李欣;张晋;杨生权
关键词：小麦;农艺性状;聚类分析;主成分分析
-
玉米品种德育丰568及栽培技术
作者：程宏;史海萍;冯瑞云
关键词：玉米;杂交种;德育丰568;特征特性;栽培技术
-
水力驱动带状喷灌机喷头的优化设计
作者：王慧杰;冯瑞云;刘晶;刘跃鹏
关键词：水力驱动;带状喷灌;喷头;优化设计
