文献类型: 中文期刊
作者: 袁秀芳 1 ; 王一成 1 ; 徐丽华 1 ; 刘邓 1 ; 牛登元 1 ; 王朝文 1 ;
作者机构: 1.浙江省农业科学院
关键词: 大肠杆菌不耐热性肠毒素;位点突变;真核表达;免疫反应
期刊名称: 中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2010 年 30 卷 06 期
页码: 748-752
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 大肠杆菌不耐热性肠毒素具有免疫增强的作用,为了更好的研究LT免疫增强效果,我们从临床分离大肠杆菌,提取基因组DNA,扩增出大肠杆菌不耐热性肠毒素基因LT,经位点突变,将LT210位的A突变为G,突变后的LT克隆到真核表达载体pCI质粒中,命名为pCI-LT(R210G),磷酸钙共沉法转染IBRS细胞证实LT(R210G)体外获得表达。将pCI-LT(R210G)免疫小鼠,ELISA结果表明:免疫小鼠两周后体内检测到特异性抗LT抗体,4周达到最高值。同时,MTT试验结果表明免疫小鼠产生强烈的淋巴细胞增殖反应。研究结果证明已成功构建pCI-LT(R210G)真核表达质粒,是一种极有发展前景的基因疫苗。
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