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基于牡蛎疱疹病毒DNA聚合酶基因的巢式PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 高文辉 1 ; 白昌明 2 ; 蔡生力 1 ; 王崇明 2 ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词： 牡蛎;疱疹病毒;巢式PCR;分子变异;特异性

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2016 年 40 卷 03 期

页码： 326-333

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立适用于Os HV-1不同变异株的检测方法,在牡蛎疱疹病毒(Os HV-1)3个变异株全基因组序列比对的基础上,筛选到牡蛎疱疹病毒基因组中高度保守的DNA聚合酶(DNA polymerase)基因,据此设计巢式PCR引物,优化PCR反应体系和条件,建立了基于Os HV-1 DNA聚合酶基因的巢氏PCR检测方法(P-n PCR检测方法),利用P-n PCR与Cn PCR检测方法对不同年份和宿主来源的Os HV-1疑似感染样本进行检测。结果显示,Pn PCR检测方法能稳定地检出100拷贝/μL的病毒DNA;P-n PCR较C-n PCR检测方法具有更强的特异性和更高的检出率。研究表明,本研究建立的P-n PCR检测方法适用于Os HV-1不同变异株的检测,可为该病毒的检测和流行病学调查提供可靠的技术支持。

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