文献类型: 中文期刊
作者: 陈如敬 1 ; 吴学敏 1 ; 陈秋勇 1 ; 严山 1 ; 车勇良 1 ; 王晨燕 1 ; 周伦江 1 ;
作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程中心
关键词: 猪圆环病毒3型;去核定位信号;结构蛋白;原核表达
期刊名称: 动物医学进展
ISSN: 1007-5038
年卷期: 2020 年 41 卷 011 期
页码: 24-28
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为探讨猪圆环病毒3型(PCV3)去核定位信号结构蛋白(Cap)的生物学功能及其在血清学检测中的作用,应用Oligo 7.0软件设计特异性引物序列,采用PCR方法从PCV3福建株阳性核酸中扩增获得其去核定位信号的Cap基因片段.将目的片段克隆到原核表达载体pET28a(+)上获得阳性重组表达质粒pET28a-Cap,进行原核表达条件优化.经SDS-PAGE分析其最优表达条件为IPTG浓度为0.4 mmol/L、37℃诱导表达4 h,目的蛋白大小约为25 ku.表达的去核定位信号Cap蛋白经Western blot和ELISA分析,具有良好的生物学活性.研究结果为开展PCV3去核定位信号基因功能研究和储备血清学诊断试剂盒奠定了基础.
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