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猪圆环病毒3型去核定位信号的Cap蛋白原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 陈如敬 1 ; 吴学敏 1 ; 陈秋勇 1 ; 严山 1 ; 车勇良 1 ; 王晨燕 1 ; 周伦江 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程中心

关键词： 猪圆环病毒3型;去核定位信号;结构蛋白;原核表达

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2020 年 41 卷 011 期

页码： 24-28

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探讨猪圆环病毒3型(PCV3)去核定位信号结构蛋白(Cap)的生物学功能及其在血清学检测中的作用,应用Oligo 7.0软件设计特异性引物序列,采用PCR方法从PCV3福建株阳性核酸中扩增获得其去核定位信号的Cap基因片段.将目的片段克隆到原核表达载体pET28a(+)上获得阳性重组表达质粒pET28a-Cap,进行原核表达条件优化.经SDS-PAGE分析其最优表达条件为IPTG浓度为0.4 mmol/L、37℃诱导表达4 h,目的蛋白大小约为25 ku.表达的去核定位信号Cap蛋白经Western blot和ELISA分析,具有良好的生物学活性.研究结果为开展PCV3去核定位信号基因功能研究和储备血清学诊断试剂盒奠定了基础.

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