文献类型： 中文期刊

作者： 陶然 ¹ ; 常玉梅 ² ; 梁利群 ² ; 唐然 ² ; 窦新杰 ² ; 王楠 ² ; 李明云 ¹ ;

作者机构： 1.宁波大学海洋学院

2.淡水鱼类育种国家地方联合工程实验室农业部淡水水产生物技术与遗传育种重点实验室中国水产科学研究院黑龙江水产研究所

关键词： 金鱼;Tgf2转座子;MCS序列;转基因斑马鱼

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2014 年 0 卷 02 期

页码： 124-129

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以金鱼pTgf2-EF1α-EGFP转座子为基础,构建含有多克隆位点(Multiple cloning sites,MCS)序列以及外源目的基因肌醇-3-磷酸合成酶(Myo-inositol-3-phosphate synthase,MIPS)的重组表达载体并注射到斑马鱼1-2期受精卵,检测重组表达载体pTgf2-EF1α-MCS-EGFP和pTgf2-EF1α-MCS-MIPS-EGFP在斑马鱼中绿色荧光蛋白基因(EGFP)的表达情况以及外源基因MIPS在斑马鱼体内的整合情况。荧光观察结果显示,两个重组载体均不影响EGFP的表达,只是表达强度存在一定差异,表明对Tgf2转座子的改造是有效的。转基因斑马鱼PCR检测结果显示,靶基因MIPS的编码区能够完整地整合到斑马鱼基因组中,整合效率达31.4%。重组表达载体的成功构建显示金鱼Tgf2转座子可以介导外源基因在斑马鱼中的表达,为以后Tgf2转座子在鱼类基因功能研究方面奠定了基础。