文献类型： 中文期刊
作者： 吕家轩 1 ; 张传健 2 ; 侯继波 2 ; 费荣梅 1 ; 王继春 2 ;
作者机构： 1.南京农业大学动物医学院
2.江苏省农业科学院动物免疫工程研究所
关键词： 伪狂犬病病毒;细菌人工染色体;US3基因;点突变;生物学特性
期刊名称： 畜牧与兽医
ISSN： 0529-5130
年卷期： 2020 年 008 期
页码： 95-100
收录情况： 北大核心
摘要： 为探究US3基因失活对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)变异株毒力的影响,运用En Passant操作技术,将PRV变异株AH02LA细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)BACPRV-G中US3基因的起始密码子进行点突变,获得重组BAC株BACPRV-G-US3mut.将BACPRV-G-US3mut与带有同源臂和PRV AH02LA gE/gI基因的片段共转染猪睾丸(ST)细胞,拯救病毒的同时将gE/gI基因进行恢复,获得重组病毒PRV-US3mut.生长动力学试验发现:PRV-US3mut在感染ST细胞早期(6 h和12 h)无病变发生,在感染24 h之后,与亲本毒株PRV AH02LA生长动力学相似,表明US3基因可能介导病毒增殖的早期阶段.此外,研究发现了US3基因抑制PRV感染ST细胞早期组织相容性复合物Ⅰ的mRNA转录.BALB/c小鼠的致病力试验发现,相较于亲本毒株PRV AH02LA(LD50=10-3.26/0.2mL),PRV-US3mut(稀释10-2~10-5)攻毒小鼠全部存活,表明US3基因可能介导PRV对小鼠的致病性.本研究成功构建了PRV变异株US3基因失活株,为研制针对PRV变异株的弱毒疫苗奠定了基础.
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