文献类型： 中文期刊

作者： 杨悦 ¹ ; 王锐 ¹ ; 甘源 ¹ ; 郝飞 ¹ ; 谢星 ¹ ; 张磊 ¹ ; 邵国青 ¹ ; 孟庆国 ¹ ; 陈蓉 ¹ ; 冯志新 ¹ ;

作者机构： 1.南京师范大学海洋科学与工程学院;江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部兽用生物制品工程重点实验室;南京农业大学生命科学院;兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心

关键词： 猪初乳;SIgA;纯化;鉴定

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2023 年 54 卷 009 期

页码： 3884-3894

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 分泌型免疫球蛋白A(SIgA)是黏膜免疫的主要效应分子,在临床上常常作为疾病早期诊断的靶标,此外,基于SIgA的治疗性单抗和靶向SIgA产生的黏膜疫苗也越来越受到关注.分离并纯化出完整且具有活性的SIgA是产品研发的前提.为了提高猪初乳中SIgA的纯化效率,本研究采用串联亲和层析,强阴离子柱和精细分子筛层析进行纯化,从10 mL初乳中获得3 mg具有活性的SIgA.使用Western blot对纯化的SIgA进行鉴定,结果表明,纯化的SIgA与抗猪的重链蛋白单抗和抗SC单抗均具有良好的反应性.使用ELISA测试SIgA与抗猪的IgA重链单抗的反应性,结果发现使用本方法纯化的SIgA较原先方法(即硫酸铵沉淀,DEAE52弱阴离子层析,Sepha-dexG-200凝胶层析和多次亲和层析的纯化方法)具有更高的反应性.最后使用质谱鉴定纯化的蛋白,结果表明为猪的SIgA.本研究为从猪初乳中纯化SIgA建立了一种高效的纯化方法,也为其它来源的SIgA的纯化提供参考.