文献类型： 中文期刊

作者： 段媛媛 ¹ ; 罗孝荣 ¹ ; 周武先 ¹ ; 游景茂 ¹ ; 郭晓亮 ¹ ; 卢超 ¹ ; 郭杰 ¹ ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院中药材研究所湖北省农业科技创新中心中药材研究分中心

关键词： 淫羊藿;分子标记;ISSR;体系优化

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2020 年 02 期

页码： 482-487

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究采用均匀设计和单因素试验相结合的方法,探寻淫羊藿ISSR-PCR的各组分(即引物, 2×Taq Master Mix,模板DNA)的最佳用量及退火温度对ISSR-PCR扩增的影响,为进一步使用ISSR分子标记分析淫羊藿的遗传多样性提供科学依据。结果表明,筛选的最佳体系为:在20μL的体系中,模板DNA的量为30ng,2×Taq Master Mix的量为9.8μL,引物为0.325μmol/L。此外,筛选出7条多态性较好、条带稳定的引物(UBC-808, UBC814, UBC826, UBC827, UBC840, UBC846及UBC856),并对其进行温度梯度PCR,结果表明,所选引物的最佳退火温度介于46.8℃～65℃之间。在此基础上,对13份淫羊藿种质资源进行ISSR扩增验证,结果表明建立的最佳反应体系扩增效果较好,稳定性强,对淫羊藿的遗传多样性分析、鉴定等具有较好的应用价值。