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H9亚型鸭源禽流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR快速检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 万春和 1 ; 林甦 1 ; 施少华 1 ; 林秋敏 1 ; 陈红梅 1 ; 程龙飞 1 ; 傅光华 1 ; 林芳 1 ; 林建生 1 ; 黄瑜 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: H9亚型禽流感病毒;SYBR GreenⅠ;实时荧光定量PCR(RRT-PCR)

期刊名称: 福建农业学报

ISSN: 1008-0384

年卷期: 2010 年 25 卷 04 期

页码: 387-391

摘要: 针对H9亚型禽流感HA基因保守序列设计引物,建立基于SYBR GreenⅠ检测模式的荧光定量RT-PCR(real-ti me RT-PCR,RRT-PCR),最低检测限为8.33×102拷贝质粒DNA,与常规PCR相比,灵敏度高出100倍。扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(83.83±0.22)℃,组内变异系数为0.52%~1.48%,组间变异系数为0.71%~2.21%,可重复性好;对H5亚型禽流感病毒、鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、鸭源禽1型副粘病毒无扩增;检测速度快,从样本处理到报告结果仅需4.5 h。

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