文献类型: 中文期刊
作者: 张存 1 ; 叶伟成 1 ; 王一成 1 ; 袁秀芳 1 ; 尹龙勃 2 ;
作者机构: 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所
2.西北农业大学动物医学院
关键词: 牛Ⅰ型疱疹病毒;感染性克隆;细菌人工染色体;囊膜蛋白gN;UL49.5
期刊名称: 科学通报
ISSN: 0023-074X
年卷期: 2009 年 24 期
页码: 3823-3829
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 通过同源重组将pHA2质粒插入到牛Ⅰ型疱疹病毒ZJ分离株基因组的UL15和UL18基因之间,构建了重组病毒rBHV1-HA;提取重组病毒的环状基因组DNA,转化大肠杆菌DH10B,获得了含有BHV1全基因组的感染性细菌人工染色体克隆pBHV1.pBHV1转染MDBK细胞可以拯救出病毒,该病毒与野生毒株在细胞上的繁殖特性未见差异.通过两步Red E/T重组,构建了gN基因跨膜区缺失的pBHV1突变体,并转染获得了重组病毒rBHV1-△gN.病毒繁殖动态曲线显示,rBHV1-△gN的滴度比野生毒株低9%~20%.BHV1感染性克隆的成功构建,将为研究新型BHV-1基因缺失疫苗和牛的病毒载体疫苗提供技术平台.
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