文献类型： 中文期刊

作者： 傅秋玲 ¹ ; 刘伟 ¹ ; 黄瑜 ¹ ; 傅光华 ¹ ; 万春和 ¹ ; 程龙飞 ¹ ; 陈红梅 ¹ ; 施少华 ¹ ; 刘荣昌 ¹ ; 陈珍 ¹ ; 陈翠腾 ¹ ; 林建生 ¹ ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 鸭1型甲肝病毒亚型;单克隆抗体;生物学特性

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2017 年 44 卷 02 期

页码： 554-560

收录情况： 北大核心

摘要： 为制备抗鸭1型甲肝病毒亚型(DHAV-1a)结构蛋白VP1的单克隆抗体(MAbs),本研究以pGEX-VP1重组蛋白免疫BALB/c小鼠,同时以纯化浓缩的全病毒作为包被抗原,建立了筛选抗VP1蛋白阳性杂交瘤细胞株的间接ELISA方法,经融合、筛选制备杂交瘤细胞及鉴定MAbs的稳定性、特异性、腹水效价和中和活性等生物学活性,获得了2株持续且稳定分泌抗体的杂交瘤细胞(1A2和5G3)。MAbs腹水ELISA效价分别为1∶3.2×104和1∶2.0×106。亚类鉴定均为IgG1/κ型。Western blotting结果显示,2株MAbs均能与DHAV-1aVP1蛋白和DHAV-1a全病毒发生特异性反应。特异性试验结果显示2株MAbs能与鸭1型甲肝病毒(DHAV-1)和DHAV-1a发生交叉反应。中和试验结果显示5G3株具有中和活性。结果表明2株MAbs的ELISA效价高、特异性强、稳定性好,均能与DHAV-1和DHAV-1a全病毒发生特异性反应,其中一株具有中和活性。