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猪肺炎支原体黏附因子基因R_1R_2区的克隆及表达

文献类型: 中文期刊

作者: 张映 1 ; 贾广乐 1 ; 邵国青 2 ; 聂向庭 1 ;

作者机构: 1.山西农业大学动物科技学院

2.江苏省农科院畜牧兽医研究所

关键词: 猪肺炎支原体;黏附因子基因;R1R2区;PCR;融合表达

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2003 年 23 卷 04 期

页码: 338-341

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据 Gen Bank登录的猪肺炎支原体 2 32株 P97基因和 J株黏附因子基因设计了 1对引物 ,以我国猪肺炎支原体Z株 (强毒株 )基因组 DNA为模板 ,通过 PCR方法扩增了该株黏附因子基因的部分序列。经序列分析后 ,重新设计了1对带有 Eco R 和 Hind 酶切位点的引物 ,并经引物的定点突变 ,PCR扩增了 Z株黏附因子的 R1 R2 区。扩增产物经双酶切后克隆到表达载体 p ET- 32 (a) +中。该重组质粒经酶切鉴定后 ,将其具有正确阅读框架的重组质粒转化到大肠杆菌 BL2 1 (DE3)感受态细胞 ,37℃下经 IPTG诱导表达 ,得到相对分子质量约 2 90 0 0的融合蛋白 ,表达量约为 11%。

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