文献类型： 中文期刊

作者： 黄媛媛 ¹ ; 王佳 ² ; 陈嘉瑜 ¹ ; 甘源 ² ; 袁厅 ² ; 冯志新 ¹ ; 邵国青 ¹ ; 王先炜 ¹ ; 熊祺琰 ¹ ;

作者机构： 1.南京农业大学动物医学院

2.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

关键词： 腹膜间皮细胞;原代培养;猪;猪鼻支原体

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN：

年卷期： 2024 年 003 期

页码： 1249-1256

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在建立猪原代腹膜间皮细胞（peritoneal mesothelial cell, PMC）的分离和体外培养方法，并将其初步应用于猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis,Mhr）体外感染细胞模型。采用0.1%Ⅰ型胶原酶消化猪大网膜组织分离猪PMC细胞，通过形态学、免疫学方法鉴定细胞。使用Mhr感染PMC细胞，观察细胞形态变化，并利用乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）法检测细胞活性损伤情况。结果显示，倒置相差显微镜观察显示，分离培养的细胞早期呈拉网状，5～8 d后生长可达融合状态，细胞大小均一，呈多边形铺路石状；间接免疫荧光试验结果显示，细胞波形蛋白、角蛋白-18抗原呈阳性，第Ⅷ因子相关抗原、白细胞CD45抗原呈阴性；扫描电镜下可见细胞表面微绒毛。结果证实分离培养的细胞为猪PMC细胞，纯度达95%以上。Mhr感染后，光镜下可观察到细胞发生明显皱缩，感染组细胞的LDH释放量较对照组细胞显著升高。本研究成功建立了猪原代PMC细胞的分离培养方法，并初步用于Mhr体外感染，为研究Mhr等引起浆膜炎的病原与宿主的互作机制提供了体外细胞模型。