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黄条(鱼师)leptin原核表达与重组蛋白活性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 崔爱君 1 ; 徐永江 1 ; 姜燕 1 ; 李羽婷 1 ; 李影 1 ; 赵梓涵 1 ; 王滨 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所/深蓝渔业工程联合实验室

关键词: 黄条■;leptin;原核表达;生物活性

期刊名称: 渔业科学进展

ISSN: 2095-9869

年卷期: 2025 年 46 卷 005 期

页码: 149-157

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据黄条■(Seriola aureovittata) lepa和lepb编码氨基酸序列合成成熟肽片段,利用原核表达载体p QE30构建了黄条■leptin重组质粒lepa/p QE30、lepb/p QE30,分别转化至大肠杆菌(Escherichia coli) M15中。在37℃条件下0.5 mmol/L IPTG诱导4 h获得了Lep A和Lep B重组蛋白,主要以包涵体形式存在。重组蛋白Lep A和Lep B大小分别为17.9 k Da和17.3 k Da,经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后,经Western blotting验证,2种重组蛋白均可被6×His抗体特异性识别,表明均具有免疫活性。腹腔注射测试显示,3个浓度组(0.05、0.1和0.2μg/kg) Lep A、Lep B蛋白分别注射不同时间后(6、12和24 h)脑中lepa、lepb基因均上调或下调表达,表明本研究获得的黄条■Lep A和Lep B重组蛋白具有生物活性。研究结果可为深入研究黄条■leptin的生理功能及作用机制、生长调控专用产品提供技术支撑。

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