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基于HRM的茄子EMS突变体TILLING筛选技术体系的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 刘松瑜 1 ; 周晓慧 1 ; 杨艳 1 ; 刘军 1 ; 庄勇 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院蔬菜研究所江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室

关键词： EMS突变体;茄子;TILLING;HRM;单性结实

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2025 年 23 卷 019 期

页码： 6411-6418

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： EMS诱变育种是作物种质创新的重要手段，利用反向遗传学手段TILLING（targeting induced local lesions in genomes）筛选EMS突变体，是研究基因功能与获得优良种质的有效手段之一。本研究采用基于HRM，即高分辨率熔解曲线分析技术的TILLING筛选方法（HRM-TILLING）进行突变体筛选技术体系的探索，通过设计不同大小扩增片段引物及Mg2+浓度梯度，比较了不同条件下的HRM筛选效果，结果表明当扩增片段长度为150 bp,Mg2+浓度为3.0 mmol/L时，可以有效区分DNA 16倍混合池中ARF7A基因存在碱基差异的两种茄子（Solanum melongena L.）材料，建立了一套基于HRM的茄子EMS突变体TILLING技术的筛选方法。以含有2 000个M2株系的茄子（EP26） EMS突变体库为材料，筛选出1个ARF7A基因和2个Pad-1基因突变体株系。本研究建立的筛选技术体系可以快速、高效地筛选茄子EMS突变体，所筛选的突变体为进一步验证、获取茄子单性结实种质及功能基因组学的研究提供研究材料。

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