文献类型： 中文期刊

作者： 陈丽 ¹ ; 欧阳凤秀 ² ; 钱炳俊 ² ; 任宏 ² ; 王强 ² ; 姜庆五 ² ; 王玉炯 ² ; 刘静波 ² ; 梁婉琪 ² ; 张大兵 ² ;

作者机构： 1.宁夏大学生命科学学院

2.宁夏大学生命科学学院,复旦大学生命科学学院,南京大学生命科学学院,宁夏大学生命科学学院,上海市农业科学院农业生物技术研究中心,上海市农业科学院农业生物技术研究中心,上海市农业科学院农业生物技术研究中心 银川7500212,上海市农业科学院农业生物技术研究中心,上海市农业遗传育种重点实验室,上海2011064,上海200433,南京210093,银川750021,上海市农业遗传育种重点实验室,上海201106,上海市农业遗传育种重点实验室,上海201106,上海市农业遗传育种重点实验室,上海201106

关键词： 霍乱毒素B亚单位;胰岛素原;融合基因CTBPROIN;神经节苷脂GM1

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2005 年 21 卷 02 期

页码： 204-210

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 构建了霍乱毒素B亚单位 (CholeratoxinBsubunit,CTB)与胰岛素原 (Proinsulin)的融合基因CTB -PROIN ,将该融合基因克隆到大肠杆菌表达载体pET 30a(+)中 ,获得重组质粒pETCPI,并将该质粒转入大肠杆菌菌株BL2 1(DE3)中 ;重组菌株经IPTG诱导后 ,其表达产物经过 15 %SDS PAGE分析表明该菌株可以表达融合蛋白 ,其分子量约为 2 1. 6kD ,且主要以包涵体形式存在 ,约占全菌蛋白的 2 5 %。含CTB- PROIN重组蛋白的包涵体经过变性和复性后 ,CTB- PROIN可以在体外自组装成五聚体结构。Westernblotting分析结果表明重组CTB PROIN蛋白可分别被霍乱毒素的抗体和胰岛素的抗体识别 ,说明该蛋白具有霍乱毒素和胰岛素的双重抗原性。同时在体外 ,CTB PROIN蛋白可与神经节苷脂GM1(monosialoganglioside)特异性结合 ,表明了该融合蛋白在体外具有生物活性。这些研究结果为利用原核生物表达系统研制廉价、高效的I型糖尿病口服疫苗奠定了基础。