文献类型： 中文期刊

作者： 李志伟 ¹ ; 谭玉梅 ² ; 任锡毅 ² ; 刘永翔 ² ; 黄永会 ² ; 刘作易 ³ ;

作者机构： 1.贵州大学农学院

2.贵州省农业生物技术重点实验室

3.贵州省农业科学院

关键词： 茶叶;胶孢炭疽菌;根癌农杆菌;GFP标记;定殖

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2020 年 39 卷 008 期

页码： 3510-3518

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 茶炭疽病是茶树上的叶部病害之一,在茶树上发生严重时会导致茶叶品质和质量的下降,造成一定的经济损失.本研究以根癌农杆菌GFP基因表达载体质粒EGFP-PSK2251和一株茶胶孢炭疽菌(GZCC20-0218)为材料,通过根癌农杆菌介导转化的方法,构建茶胶孢炭疽菌的遗传转化体系,筛选获得稳定遗传的转化子.利用荧光显微镜技术揭示转化子在叶片组织内定殖的特点.研究结果表明:根癌农杆菌与茶胶孢炭疽菌的分生孢子在26℃,0.2 mol/L乙酰丁香酮(AS)诱导下得到转化子.对转化子进行绿色荧光检测、分子验证及遗传稳定性测定后,从而获得稳定遗传的绿色荧光蛋白(GFP)标记菌株.同时,试验表明GFP标记菌株仍具有致病性.GFP标记菌株进行茶叶侵染试验时,7d后茶叶发病率达到100%.发病叶片进行组织切片观察,发现胶孢炭疽菌的分生孢子可以在叶片的气孔和叶片组织内定殖.