文献类型： 中文期刊

作者： 杨启尧 ¹ ; 范佳霖 ¹ ; 秦达 ² ; 曲艺 ² ; 王嘉彬 ² ; 余丽芸 ² ; 史同瑞 ³ ; 侯喜林 ¹ ;

作者机构： 1.黑龙江八一农垦大学动物科技学院

2.黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院

3.黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院

关键词： A型产气荚膜梭菌;Fba基因;干酪乳杆菌;构建与表达

期刊名称： 黑龙江八一农垦大学学报

ISSN： 1002-2090

年卷期： 2024 年 36 卷 006 期

页码： 36-42,71

摘要： 为了构建重组乳酸菌，以A型产气荚膜梭菌全基因组DNA为模板，利用PCR技术扩增出Fba基因并将其连接到大肠杆菌表达载体p ET-28a上，鉴定正确后，用1.0 mmol·L^-1IPTG诱导表达，最佳诱导表达时间为5 h。表达的目的蛋白纯化后与弗氏佐剂乳化制备抗血清，Western blot分析表明，目的蛋白能与制备的抗血清特异结合，具有很好的反应原性。将正确的Fba基因与p LA乳酸菌载体构建成重组质粒并电转至干酪乳杆菌中，Western blot结果显示，重组的干酪乳杆菌表达的蛋白与抗血清具有良好的反应原性。间接免疫荧光、流式细胞仪检测结果表明，目的蛋白能够展示表达到菌体表面。