您好，欢迎访问江苏省农业科学院 机构知识库！
江苏省农业科学院机构知识库

全部

  • 全部
  • 标题
  • 学者
  • 机构
  • 关键词

Taqman探针实时定量PCR检测猪伪狂犬病毒

文献类型： 中文期刊

作者： 张雪寒 1 ; 何孔旺 1 ; 缪文凯 1 ; 茅爱华 1 ; 俞正玉 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所

关键词： 猪伪狂犬病毒;实时定量PCR;Taqman探针;定量检测

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2008 年 24 卷 04 期

页码： 66-69

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 选取猪伪狂犬病毒(PRV)基因组中gE基因,设计特异性引物和Taqm an探针,利用实时定量PCR来定量检测PRV。利用PCR技术扩增猪伪狂犬病毒gE基因80 bp片段,并克隆到pMD18-T载体上,阳性重组质粒命名为pgE80。pgE80质粒进行10倍系列稀释,作为荧光PCR检测的标准模板,定量拷贝数,并绘制标准曲线。以提取的PRV、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒(PRRSV)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)的DNA作为模板,进行特异性检测。该实时定量PCR方法,标准曲线斜率为-0.37,R2=0.992,可以检测到20个拷贝数。PRV能被扩增出S型荧光曲线,而其它病毒均未能扩出。用PRV强毒肌肉注射仔猪,定量PCR比普通PCR更能灵敏而特异地检出呼吸道排毒和血液带毒。建立的实时定量PCR方法可用于临床样品快捷、准确、方便地检测。

  • 相关文献

[1]猪伪狂犬病毒Real-time PCR检测方法的建立和弱毒疫苗病毒含量的检测. 华涛,唐波,黄江,常晨,刘国阳,张雪花,侯继波,张道华. 2019

[2]猪伪狂犬病毒变异株AH02LA单因子发病模型的建立. 毛爱民,范锋,王继春,冯志新,华利忠,刘剑锋. 2017

[3]猪伪狂犬病病毒新流行变异毒株的研究进展. 华利忠,刘剑锋,冯志新,杨若松,邵国青. 2017

[4]2016年江苏省部分猪场猪伪狂犬病原学监测与变异性分析. 袁朗,胡金成,张敬峰,张晓曦,孙华伟. 2018

[5]兔出血症病毒2型TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用. 陈萌萌,仇汝龙,范志宇,胡波,宋艳华,魏后军,朱伟峰,徐为中,王芳. 2021

[6]灰飞虱2种热激蛋白基因Hsp70的克隆、分析. 张青,陆明星,祝树德. 2015

[7]灰飞虱热激蛋白Hsp90基因的克隆、序列分析与表达模式. 张青,陆明星,祝树德. 2014

[8]类猪圆环病毒因子P1感染对外周血单个核细胞Toll样受体mRNA转录的影响. 温立斌,何孔旺,杨汉春,郭容利,钟书霖,俞正玉,茅爱华. 2010

[9]杜梨NHX基因家族的鉴定及其在非生物胁迫下的表达分析. 王影,李慧,蔺经,杨青松,张绍铃,常有宏. 2019

[10]应用基因芯片分析甘蓝型油菜柱头特异表达基因. 李春宏,付三雄,戚存扣. 2014

[11]茶树硝态氮转运蛋白NRT1.1基因的克隆及表达分析. 杨亦扬,胡雲飞,万青,李荣林,王枫,阮建云. 2016

[12]毕氏海蓬子SbDREB基因的克隆与表达分析研究. 孙晓波,刘金兵,余桂红,张旭,张鹏,马鸿翔. 2012

[13]类猪圆环病毒因子P1感染对猪肺泡巨噬细胞外源性抗原加工递呈相关分子和共刺激分子的影响. 温立斌,何孔旺,杨汉春,刘梦雅. 2011

[14]实时定量PCR法预测禾谷丝核菌Rhizoctonia cerealis基因组大小. 张春燕,李伟,孙海燕,邓渊钰,张爱香. 2014

[15]应用real-time PCR对土壤中小麦纹枯病菌Rhizoctonia cerealis进行鉴定和定量检测. 郭英鹏,李伟,孙海燕,于汉寿,陈怀谷. 2011

[16]SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法检测猪圆环病毒2型. 潘群兴,江苏省农业科学院兽医研究所,何孔旺,黄克和. 2006

[17]猪瘟兔化弱毒疫苗株荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 刘大伟. 2009

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：江苏省农业科学院

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台