文献类型: 中文期刊
作者: 任耀军 1 ; 何恩鹏 2 ; 王新华 3 ; 薄新文 3 ;
作者机构: 1.新疆师范大学资产管理处
2.新疆师范大学运动人体科学重点实验室
3.新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室
关键词: SMAP-29;毕赤酵母;胞内表达;抑菌活性
期刊名称: 安徽农业科学
ISSN: 0517-6611
年卷期: 2012 年 40 卷 25 期
页码: 12386-12389
收录情况: 北大核心
摘要: [目的]对抗菌肽SMAP-29的基因密码子进行优化,并使其在毕赤巴斯德酵母(Pichia pastoris)中表达。[方法]根据已知抗菌肽SMAP-29的氨基酸序列,参照毕赤巴斯德酵母密码子的偏好性,设计合成抗菌肽SMAP-29成熟肽基因片段,并同载体pPIC3.5K连接,电击转化至毕赤酵母受体菌GS115中,经G418筛选高拷贝转化子,并用MM、MD板和PCR法筛选Mut+表型。用甲醇诱导表达构建好的重组酵母表达基因工程菌,并裂解酵母细胞进行Tricine-SDS-PAGE分析。[结果]在诱导至第2天的细胞裂解液中检测到与预测的SMAP-29分子量相当,约为3.2 kD的表达带;表达产物对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌有明显的抑菌作用,而对大肠杆菌抑菌效果不明显。[结论]该研究为SMAP-29在生物医学、农业等领域中的应用奠定基础。
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