文献类型： 中文期刊
作者： 江锦秀 1 ; 张靖鹏 1 ; 林裕胜 1 ; 游伟 1 ; 胡奇林 1 ;
作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： 山羊地方性鼻内肿瘤病毒;表面蛋白;原核表达;多克隆抗体
期刊名称： 福建农业学报
ISSN：
年卷期： 2021 年 002 期
页码： 135-140
收录情况： CSCD
摘要： 【目的】明确山羊地方性鼻内肿瘤病毒（ENTV-2）SU蛋白的功能。【方法】采用RT-PCR方法从ENTV-2FJ分离株中扩增获得SU基因片段,将其克隆到pMD-19T载体;测序验证后,再亚克隆到PET-32a（+）上,在RosettagamiB（DE3）感受态细胞进行表达,采用SDS-PAGE、Western-blot和ELISA对重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。【结果】结果显示,表达的重组菌融合蛋白大小约64.38 kD,在IPTG终浓度0.4 mmol·L-1、 37℃诱导4 h表达效果最好。用纯化的ENTV-2进行SDS-PAGE,SU重组蛋白免疫小鼠制备的多克隆抗体作为一抗,进行Western-blot,结果显示鼠抗SU蛋白多克隆抗体能与ENTV-2抗原进行特异性的反应。【结论】表达的SU蛋白有较好的抗原性,为制备ENTV-2特异性单克隆抗体及建立ENTV-2特异性血清学方法奠定了基础。
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