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猪链球菌2型PCR-ELISA检测方法的建立与优化

文献类型： 中文期刊

作者： 方勤美 1 ; 朱继昌 1 ; 池洪树 1 ; 林天龙 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院生物技术研究所

关键词： 猪链球菌2型、PCR-ELISA;cps2j基因

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2012 年 27 卷 12 期

页码： 1275-1279

摘要： 根据已发表的猪链球菌2型的cps2j基因序列,设计合成上游标记生物素的1对引物和1条标记地高辛的特异性探针,建立了该菌的PCR-ELISA检测方法。方法利用PCR仪作为杂交场所,并对几个主要条件参数进行优化,结果显示在鲑鱼精DNA浓度1.6mg·mL-1、变性温度为94℃、变性时间为1min、探针浓度为0.5umol·mL-1、杂交温度55℃、杂交时间1min、一抗作用时间45min、二抗作用时间40min时检测方法敏感性最好,特异性最强。通过对17个阴性样本检测,测得平均值为0.057,方差为0.047,计算得临界值为0.198。

  • 相关文献

[1]猪源2型链球菌福建株cps2j基因PCR检测及序列分析. 俞伏松,郭长明,车勇良,林天龙,陈少莺. 2009

[2]猪源2型链球菌福建株CPS2J基因PCR检测及序列分析. 俞伏松. 2009

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