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口蹄疫病毒A/AKT/58株基因组全长感染性cDNA克隆的体内拯救

文献类型: 中文期刊

作者: 白兴文 1 ; 李平花 2 ; 曹轶梅 3 ; 李冬 4 ; 卢曾军 5 ;

作者机构: 1.家畜疫病病原生物学国家重点实验室

2.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室国家口蹄疫参考实验室

3.中国农业科学院兰州兽医研究所

4.浙江省农业科学院数字农业研究所

5.中国农业科学院兰州兽医研究所农业部病毒学重点实验室

关键词: 口蹄疫病毒;感染性cDNA克隆;体内转录;A/AKT/58株

期刊名称: 中国科学(C辑:生命科学)

ISSN: 1006-9259

年卷期: 2008 年 38 卷 11 期

页码: 1028-1035

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 构建了两种口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)基因组全长cDNA克隆pTA/FMDV和pCA/FMDV,利用体外转录和体内转录方法制备感染性病毒,并对其抗原性,乳鼠毒力(LD50)和病毒生长动力学等生物学特性进行了分析.为了鉴别野毒与重组病毒,利用融合PCR技术在两种全长cDNA基因组内分别引入了几个点突变(pTA/FMDV:T1029G,pCA/FMDV:A174G,A308G,T1029G)作为遗传标记.结果表明,两种重组病毒对3日龄乳鼠均表现致病性.但是由pTA/FMDV合成的感染性体外转录本RNA的毒力较弱(10?6);而与pCT7RNAP质粒共转染的pCA/FMDV体内拯救病毒的毒力较强(10?7.5),并在BHK-21细胞上表现出与野毒相似的生长特性.这一结果表明,在FMDV的拯救过程中,以pCT7RNAP为基础的体内拯救系统相比体外转录方法更为简便、实用.该系统为利用反向遗传操作技术深入研究FMDV的分子致病机制及其准种特性等奠定了良好的基础.

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