文献类型: 中文期刊
作者: 倪艳秀 1 ; 何孔旺 1 ; 俞正玉 1 ; 张雪寒 1 ; 王芳 1 ; 郭容利 1 ;
作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所
关键词: 肠毒素性大肠杆菌;mSTⅠ-linker-LTB融合基因;表达;免疫保护
期刊名称: 农业生物技术学报
ISSN: 1006-1304
年卷期: 2007 年 15 卷 03 期
页码: 383-387
收录情况: CSCD
摘要: 用分子生物学方法拼接成肠毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)mSTⅠ-linker-LTB融合基因,并定向克隆到pET-32α(+)中,转化宿主菌(E.coli)BL21(DE3)。重组菌经1mmolLIPTG诱导,在30℃下,5h时表达产物(分子量约为37kD)达到高峰,表达量约占菌体总蛋白30%。表达产物主要存在包涵体中,经Westernblot鉴定呈阳性。乳鼠胃内接种实验证明,融合蛋白无野生型STⅠ的生物毒性。将融合蛋白与矿物油乳化后免疫ICR小鼠,对K88、K99、987P和F41的保护率分别为83.3%、100%、66.7%和66.7%。
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