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新型鹅黄病毒JS804毒株的分离与鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 黄欣梅 1 ; 李银 1 ; 赵冬敏 1 ; 刘宇卓 1 ; 张敬峰 1 ; 何孔旺 1 ; 侯继波 1 ; 钮慧敏 1 ; 李彬 1 ; 温立斌 1 ; 王永山 1 ; 邵国青 1 ; 张康宁 2 ; 朱江宁 2 ; 吴东明 2 ; 高磊 2 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.常州市四季禽业有限公司

关键词: 鹅;非序列依赖性单引物扩增法;黄病毒;JS804毒株

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2011 年 27 卷 02 期

页码: 354-360

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 2010年4月至11月,江苏等地鸭、鹅发生了一种以产蛋率、采食量显著下降,出现脑炎样神经症状为特征的传染病。对发病鹅进行剖检观察,鸭胚尿囊腔途径接种发病鹅病料分离病原,电镜观察病毒粒子。对健康鹅接种分离病毒进行动物回归试验。在病毒核酸背景未知的情况下,应用非序列依赖性单引物扩增法结合DNA酶处理(DNase-sequence independent single primer amplification,DNase-SISPA)对病原基因进行扩增,并在此基础上设计了1对特异性引物对病毒基因进行PCR扩增。剖检结果发现病鹅的脑膜、肺脏、肝脏、心脏、卵巢等多器官出血,脾脏肿大坏死。含毒鸭胚尿囊膜超薄切片电镜观察显示:病毒粒子直径为50~60 nm。动物回归试验成功复制出该病并分离到病毒。应用DNase-SISPA方法发现了3个病毒相关基因片段,经序列比对分析,与黄病毒属(Flavi-virus)坦布苏病毒(Tembusu virus)基因序列有很高的同源性,分别为96%、88%、93%。据此设计特异性引物扩增出一段985 bp基因片段,该片段与黄病毒属坦布苏病毒E基因的核苷酸同源性为91%,氨基酸同源性为97%。将分离的鹅黄病毒毒株命名为Goose/Jiangsu/804/2010(简称JS804)。研究结果表明:此次鸭、鹅新发疫病的病原为一种新的黄病毒。

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