文献类型： 中文期刊

作者： 赵冬敏 ¹ ; 刘青涛 ¹ ; 韩凯凯 ¹ ; 黄欣梅 ¹ ; 刘宇卓 ¹ ; 李银 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程重点实验室

关键词： 新型鹅星状病毒;衣壳蛋白;B细胞受体;互补决定区

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2025 年 41 卷 003 期

页码： 549-558

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究根据鹅星状病毒(GoAstV)衣壳蛋白(Cap)基因序列，通过人工合成获得衣壳蛋白基因片段，并构建重组杆状病毒rBV-Cap。通过间接免疫荧光检测、Western Blot鉴定和透射电镜观察，发现rBV-Cap在sf9细胞中高效表达，衣壳蛋白可自组装形成与天然鹅星状病毒结构相似的病毒样颗粒。将纯化的衣壳蛋白免疫BALB/c小鼠，酶联免疫吸附试验(ELISA)和病毒噬斑减少中和试验结果表明，重组衣壳蛋白具有较好的免疫原性，可诱导小鼠产生高水平抗体。为进一步探究B细胞免疫应答特征，分别摘取对照小鼠和免疫后的小鼠脾脏组织，利用单细胞免疫谱测序技术对B细胞受体(BCR)组库进行测序分析。结果表明，对照小鼠BCR重链(H)-CDR3多肽链长度主要为13 aa,免疫后的小鼠BCR重链(H)-CDR3多肽链长度主要为14 aa。与对照相比，免疫后的小鼠免疫球蛋白G(IgG)数量和占比升高，表明Cap蛋白能够有效刺激小鼠产生IgG抗体。与对照相比，Cap蛋白免疫后的小鼠BCR组库多样性指数(D50值)降低，表明免疫后BCR多样性降低。但是免疫后的小鼠某些克隆型细胞数量增加，表明免疫会引起特定克隆型的扩增。对照小鼠对IGHV1、IGHV2、IGHV5基因的取用频率较高，而免疫后的小鼠对IGHV1、IGHV6、IGHV9基因的取用频率较高。对照小鼠和免疫后的小鼠对IGHJ基因的取用频率无显著差异。与对照相比，免疫后小鼠的IGHV7-3-IGHJ2配对和IGHV2-6-2-IGHJ2配对的频率增加。免疫后的小鼠体内存在IGHV2-2-IGHJ1和IGHV5-1-IGHJ1配对，而对照小鼠体内未检测到这2种类型的配对，表明Cap蛋白免疫导致小鼠V-J基因配对发生改变。本研究结果为基于B细胞表位的亚单位疫苗研发提供了理论支持。