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实时荧光定量PCR检测鸭源鹅细小病毒方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 杨挺懿 1 ; 杨婧 1 ; 黄欣梅 1 ; 韩凯凯 1 ; 赵冬敏 1 ; 章丽娇 1 ; 刘宇卓 1 ; 李银 1 ; 张小飞 1 ; 刘青涛 1 ;

作者机构: 1.南京农业大学动物医学院;江苏省农业科学院兽医研究所

关键词: 鸭源鹅细小病毒;实时荧光定量PCR;排毒

期刊名称: 中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2024 年 32 卷 001 期

页码: 104-109

收录情况: 北大核心

摘要: 为建立一种快速且准确检测鸭源鹅细小病毒(D-GPV)的实时荧光定量PCR方法,本研究通过分析D-GPV基因序列的保守区设计并合成一对特异性引物,构建携带NS1基因的重组质粒作为标准品,绘制实时荧光定量PCR标准曲线,并进行敏感性、特异性、重复性试验和临床样品的检测.结果显示,该方法标准曲线的的线性关系良好,相关系数为0.999;灵敏度高,检测底限为10拷贝;特异性与重复性好,与其他病毒无交叉反应,批间和批内变异系数均低于1%.该方法对人工感染D-GPV鸭泄殖腔拭子和咽拭子样品的检测结果显示,鸭在攻毒后第1d即可以通过口腔和泄殖腔向外排毒,排毒量在第3d达到高峰,排毒持续期可达到42d.本研究所建立的实时荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性和稳定性好,可用于临床样品中的D-GPV检测.

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