文献类型： 中文期刊
作者： 章丽娇 1 ; 田宇杰 1 ; 张兰香 1 ; 赵冬敏 1 ; 韩凯凯 1 ; 黄欣梅 1 ; 杨婧 1 ; 吴凤瑶 1 ; 刘青涛 1 ; 刘宇卓 1 ; 张小飞 1 ; 李银 1 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所
关键词： 坦布苏病毒;绿色荧光蛋白;报告病毒
期刊名称： 动物医学进展
ISSN： 1007-5038
年卷期： 2024 年 006 期
页码： 44-50
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 报告病毒在高通量抗病毒药物筛选、活体动物体内成像及新型疫苗研发等方面具有重要应用价值.通过反向遗传操作技术,以坦布苏病毒JXSP株感染性克隆为基础,采用两种策略构建报告病毒,即分别在病毒基因组5′UTR和C蛋白基因、N S5基因和3′UTR间引入外源基因EGFP,通过融合PCR获得全长cDNA PCR产物,体外转录生成mRNA,转染至BHK-21拯救重组病毒并研究其生长特性.结果显示,利用5′UTR-C位点构建的报告病毒mRNA转染BHK-21细胞后能观察到明显的绿色荧光;报告病毒P0接种DEF细胞后可高强度表达绿色荧光蛋白,在BHK-21和DEF细胞上增殖速度略微低于亲本毒株,但差异不显著.结果表明,成功构建了1株坦布苏绿色荧光报告病毒rJXSP-5′EGFP,在BHK-21和DEF细胞上均能有效增殖.
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