文献类型： 中文期刊
作者： 李永亮 1 ; 田美娜 1 ; 卢曾军 1 ; 杨苏珍 2 ; 付元芳 3 ; 曹轶梅 1 ; 刘在新 1 ;
作者机构： 1.中国农业科学院兰州兽医研究所
2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室
3.甘肃农业大学动物医学院
关键词： 口蹄疫病毒;非结构蛋白;3B蛋白;单克隆抗体
期刊名称： 江苏农业学报
ISSN： 1000-4440
年卷期： 2009 年 25 卷 02 期
页码： 78-82
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 用E.coli原核表达并纯化的口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)非结构蛋白3B免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,间接ELISA筛选出分泌鼠IgG的杂交瘤细胞株,将该杂交瘤细胞注射小鼠产生的腹水,用间接ELISA法筛选获得6株能稳定分泌抗3B蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3E5、4B1、4D7、4E11、7B2、8B11。鉴定结果显示,4B1和4E11细胞分泌IgG1,其余4株细胞分泌IgG2b;纯化后6株腹水单抗的纯度达90%以上,对3B蛋白的ELISA滴度均可达到1∶100000以上;6株单抗均不与FMDV结构蛋白VP1和3D非结构蛋白发生反应;间接免疫荧光试验证明所制备的单抗能够识别3B蛋白;杂交瘤细胞株连续培养3个月以及冻存6个月后复苏,细胞生长良好,杂交瘤细胞分泌的抗体效价稳定。
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