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基于ITS Sanger测序的香蕉杂交和自交后代的鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 曾鸿运 1 ; 许林兵 1 ; 吴元立 1 ; 黄秉智 1 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院果树研究所农业农村部南亚热带果树生物学与遗传资源利用重点实验室广东省果树科学与技术研究重点实验室

关键词: 香蕉;种质资源;杂交;自交;分子鉴定;ITS

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2024 年 40 卷 012 期

页码: 53-60

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】以核糖体内部转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)为分子标记,鉴定新创制的杂交和自交香蕉子代,为香蕉育种和遗传研究奠定基础。【方法】提取亲本及其疑似后代的DNA,PCR扩增和Sanger测序,利用软件“DNAMAN”和“SnapGene”进行序列比对,分析ITS的多态性,从而确定杂交和自交后代。当疑似子代植株的ITS序列与亲本相比,在一个或多个碱基位点上显示出差异时,该植株被归类为阳性植株;反之,若未发现此类差异,则判定其为假阳性植株。【结果】以‘广粉1号’栽培蕉和‘天野BB1号’野生蕉、‘粉杂1号’栽培蕉自交以及‘尖苞片蕉1号’和‘尖苞片蕉2号’共3个组合的疑似后代为材料,通过性状观察,发现只有部分子代植株与亲本存在某些差异,无法准确判断杂交和自交是否成功;而利用前期建立的香蕉ITS Sanger测序法,发现其与亲本的ITS存在显著差异并有一定联系,说明这些材料都是阳性植株。【结论】‘广粉1号’和‘天野BB1号’‘粉杂1号’自交以及‘尖苞片蕉1号’和‘尖苞片蕉2号’的疑似后代均为阳性植株。ITS Sanger测序法可用于香蕉杂交和自交后代的鉴定。ITS Sanger测序法对相同杂交或自交组合产生的不同子代也有一定的基因分型效果。

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