您好,欢迎访问广东省农业科学院 机构知识库!

鸡树突状细胞的间接免疫荧光制片方法比较

文献类型: 中文期刊

作者: 何静怡 1 ; 舒鼎铭 1 ; 林楚晓 1 ; 李莹 1 ; 王艳 1 ; 罗成龙 1 ;

作者机构: 1.广东省农业科学院动物科学研究所/畜禽育种国家重点实验室/农业农村部家禽遗传育种重点实验室/广东省动物育种与营养公共实验室/广东省畜禽育种与营养研究重点实验室

关键词: 鸡;树突状细胞;免疫荧光;激光共聚焦扫描;细胞爬片法;细胞滴片法

期刊名称: 广东农业科学

ISSN:

年卷期: 2020 年 010 期

页码:

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: [目的]比较分析骨髓源鸡树突状细胞两种间接免疫荧光制片方法(细胞爬片法和细胞滴片法),以进一步提高研究树突状细胞生物学的实验技术和方法.[方法]以鸡胚为试验素材,分离原代细胞,定向诱导分化获得未成熟的树突状细胞,并利用新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)lasota株激活细胞.监测内源性蛋白ROBO2(Roundabout)和外源性蛋白NDV表达情况,鸡源NDV抗体与小鼠源ROBO2单克隆抗体混合孵育,结合荧光素二抗进行标记.应用激光共聚焦扫描显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)对树突状细胞进行荧光成像并捕抓图像数据,多方位分析对比细胞爬片法和细胞滴片法.[结果]细胞滴片制作过程繁琐且耗时长;细胞爬片则操作简单可缩短实验时间.两种制片方法的NDV和ROBO2单阳性和阴性分别存在极显著差异,双阳性存在荧光反应性显著差异.[结论]滴片法蛋白免疫反应性更优,适合标记目的蛋白进行亚细胞定位.爬片法始终维持细胞形态学特征和保持蛋白特性,利于两抗体荧光重叠,综合显色性更强.

  • 相关文献

[1]鸡骨髓源树突状细胞体外转化培养. 何静怡,罗成龙. 2017

[2]副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5对豚鼠树突状细胞成熟及功能影响. 佘志成,范红结,李春玲,王贵平,贾爱卿,杨冬霞. 2011

[3]免疫调节剂与抗球虫药联合应用的抗球虫效果. 樊福好,谢明权,林辉环. 2000

[4]复合型鼠类不育剂CQ-1对鸡安全陛的初堋. 隋晶晶,冯志勇,姚丹丹. 2013

[5]免疫调节剂对球虫感染鸡的免疫学指标的影响. 樊福好,谢明权,林辉环. 2002

[6]重组鸡γ干扰素对柔嫩艾美球虫卵囊免疫鸡肠道免疫相关细胞数量的影响. YE Xiu-hua,蔡建平,WU Zhi-guang,佘锐萍,WANG Ming. 2008

[7]免疫调节剂对球虫感染鸡的免疫学指标的影响. 樊福好,谢明权,林辉环. 2000

[8]酸枣仁提取物对热环境下雏鸡体温与增重的影响. 吴小林,戴敏,陈文思,何子双,魏文康,杨宏志. 2008

[9]二甲酸钾的生物学功能及其在猪、鸡生产中的应用. 崔小燕,苟钟勇,蒋守群,蒋宗勇. 2019

[10]球虫感染对鸡肠道的损伤及其营养调控研究进展. 李龙,蒋守群. 2017

[11]鸡原始生殖细胞转染条件优化. 邹娴,何燕华,何静怡,王艳,舒鼎铭,罗成龙. 2021

[12]规模化鸡场常见体表寄生虫及其防治措施. 肖文婉,廖申权,李娟,吕敏娜,吴彩艳,蔡海明,林栩慧,胡俊菁,于林增,张健騑,戚南山,孙铭飞. 2021

[13]4个鸡品种VIPR-1基因遗传多样性分析. 周敏,刘满清,康乐,徐海平,罗成龙,梁勇,张细权. 2010

[14]发酵树叶及其在鸡生产应用的研究进展. 崔艺燕,田志梅,邓盾,刘志昌,容庭,李家洲,马现永,陈卫东. 2020

[15]RAPD标记在分析家鸡遗传变异中的应用. 朱庆,杨勇,胡刚安. 2000

[16]rChIFN-γ对E.tenella卵囊免疫雏鸡肠道分泌型IgA~+细胞数量的影响. 叶秀华,蔡建平,吴志光,易亚斯,佘瑞平,汪明. 2008

[17]白酒糟生物发酵饲料的生产工艺及其在猪和鸡生产中的应用. 王玉珏,崔艺燕,马现永,余苗. 2024

[18]鸡胚接种毒害艾美耳球虫Eimeria necatrix的免疫研究. 蔡建平,谢明权,卞国志,翁亚彪,覃宗华,叶秀华. 2005

[19]基于case-control法分析鸡脂肪性状QTL区域SNP与性状的关系. 唐军,王思兵,罗成龙,聂庆华,张细权. 2012

[20]槲皮素的生理功能及其在鸡生产上的应用. 梅华迪,田琦,屈圣富,高凤仙,马现永,李贞明,罗雪辉,余苗. 2022

作者其他论文 更多>>