文献类型： 中文期刊
作者： 余乃通 1 ; 王健华 1 ; 张雨良 1 ; 周朋 1 ; 刘志昕 1 ;
作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室
关键词： DNA2 ORF;酵母双杂交;质粒构建;自激活验证
期刊名称： 植物病理学报
ISSN： 0412-0914
年卷期： 2015 年 45 卷 04 期
页码： 376-383
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 香蕉束顶病毒DNA2组分编码蛋白的功能尚不清楚,为了揭示其编码蛋白的功能,以本实验室保存的BBTV Haikou4分离物总DNA为模板进行PCR扩增,利用Gateway重组技术将BBTV DNA2 ORF构建到酵母双杂交系统(Pro QuestTM Two-Hybrid System,Invitrogen)的诱饵载体pDEST-32中,并通过酵母表型验证、诱饵质粒毒性验证以及自激活验证。结果显示,转有pDEST32-DNA2 ORF质粒的Ma V203酵母菌具有弱的自激活背景,在3-AT浓度为25 mmol/L的Se C-Leu-TrpHis平板上生长较弱,但在3-AT浓度为50 mmol/L Se C-Leu-Trp-His平板上不生长,表明诱饵质粒背景自激活可被浓度为50 mmol/L的3-AT所抑制。在该条件下共转pDEST32-DNA2 ORF和文库质粒到MaV203感受态细胞进行互作蛋白筛选,通过PCR和测序等手段最终鉴定35个候选蛋白基因,分别编码转录调控因子、生长发育相关蛋白、代谢相关蛋白、抗逆相关蛋白和未知蛋白等。酵母双杂交BBTV DNA2 ORF诱饵质粒的构建及其与寄主互作蛋白的筛选,为揭示DNA2组分的蛋白功能提供了科学线索。
- 相关文献
[1]高粱花叶病毒Hcpro、CP和PIPO基因酵母双杂交载体构建及自激活验证. 张雨良,黄启星,张树珍,王健华,余乃通,刘志昕. 2014
[2]表达绿色荧光蛋白重组乳酸杆菌的构建及电击转化条件. 田兴山,张玲华,周风珍,李国立,孙晓刚. 2005
[3]青枯菌诱导的桑树根部酵母双杂交文库构建和MaTGA1互作蛋白的筛选及鉴定. 戴凡炜,王振江,罗国庆,钟建武,李智毅,唐翠明. 2023
[4]高粱花叶病毒Hcpro、CP和PIPO基因酵母双杂交载体构建及自激活验证. 张雨良,黄启星,张树珍,王健华,余乃通,刘志昕. 2012
[5]番木瓜果实酵母双杂交文库的构建及CpMYB114L互作蛋白的筛选. 周陈平,杨敏,郭金菊,邝瑞彬,杨护,黄炳雄,魏岳荣. 2022
[6]巴西橡胶树乳管细胞中与HbRZF相互作用蛋白的初步筛选与分析. 杨子平,李辉亮,郭冬,彭世清. 2013
[7]香蕉束顶病毒cp和mp酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活验证. 王祥,张秀春,余乃通,周朋,梁洁,刘志昕. 2014
[8]巴西橡胶树胶乳酵母双杂交cDNA表达文库的构建及分析. 杨子平,李辉亮,郭冬,彭世清. 2013
[9]黄灯笼辣椒eIF4Es基因克隆及其酵母双杂交激活域载体构建. 张真,余乃通,王健华,张秀春,武亚丹. 2016
作者其他论文 更多>>
-
基于CRISPR/Cas9系统的拟南芥双链结合蛋白AtHyl1基因编辑
作者：吴坤鑫;张春微;刘志昕;余乃通;王健华;张秀春
关键词：CRISPR/Cas9;基因编辑;AtHyl1;拟南芥三突变体hyl1dcl2drb4
-
香蕉条斑病毒ORF Ⅰ基因克隆及编码蛋白和同源物的生物信息学分析
作者：黎维丽;余乃通;李俊成;王健华;李宾宾;刘志昕
关键词：香蕉条斑病毒;ORFⅠ;同源蛋白;生物信息学分析
-
CRISPR/Cas9系统在植物育种中的应用
作者：张余;张雨良
关键词：CRISPR/Cas9原理;基因编辑;编辑效率;作物改良
-
转基因番木瓜55-1品系的环介导等温扩增检测方法的建立
作者：夏启玉;李美英;肖苏生;贺萍萍;杨小亮;张雨良;郭安平
关键词：转基因番木瓜55-1;环介导等温扩增;特异性检测
-
利用CRISPR/Cas9系统编辑拟南芥2个双链结合蛋白
作者：武亚丹;张春微;刘志昕;王健华;余乃通;张秀春
关键词：CRISPR/Cas9;基因编辑;拟南芥;双链结合蛋白
-
仙人掌总RNA提取方法的改进与分析
作者：周启林;罗志文;胡福初;张治礼;刘志昕
关键词：仙人掌;RNA提取;RT-PCR;灵敏度检测
-
本生烟瞬时表达系统快速检测RNAi载体沉默效果
作者：武亚丹;张秀春;冼淑丽;余乃通;王健华;刘志昕
关键词：本生烟;瞬时表达;干扰载体;半定量RT-PCR;沉默效果检测
