文献类型: 中文期刊
作者: 汪登强 1 ; 危起伟 1 ; 罗晓松 1 ; 方耀林 1 ;
作者机构: 1.农业部淡水鱼类种质资源与生物技术重点开放实验室中国水产科学研究院长江水产研究所
关键词: 鲟形目;rDNA;PCR;限制性位点
期刊名称: 中国水产科学
ISSN: 1005-8737
年卷期: 2006 年 13 卷 06 期
页码: 885-890
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 使用长PCR技术扩增鲟形目(Acipenseriformes)15个种的核糖体DNA(rDNA)18S rRNA基因与28S rRNA基因之间约2.5 kb的片段,并用7个限制性内切酶对该片段进行限制性位点分析。结果显示,使用LATaqDNA聚合酶及GCBuffer结合长PCR技术能够很好地扩增鲟形目鱼类的rDNA。根据酶切图谱可确定93个限制性位点,其中21个为保守位点,72个多态信息位点。HhaⅠ酶切的带型在所有个体中完全一致,提示这些位点对保持rDNA的功能有重要作用。一些酶的酶切产物长度之和大于扩增产物的长度,暗示鲟形目鱼类个体内存在多个rDNA等位基因。对种间遗传距离进行计算,并构建UPGMA分子系统树,发现鲟科鱼类的系统关系与以往研究有较大差别,这可能是受个体内rDNA等位基因存在的影响,说明用酶切片段来重建鲟科鱼类的系统树不太可靠。文中还讨论了高GC含量模板的PCR扩增和rDNA在鲟形目分子系统关系中的使用。
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