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水稻黑条矮缩病毒基因组S7编码的2个非结构蛋白在病株中的表达检测

文献类型： 中文期刊

作者： 吕明芳 1 ; 羊健 2 ; 张恒木 2 ; 陈剑平 2 ;

作者机构： 1.浙江师范大学

2.浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所/浙江省植物有害生物防控国家重点实验室培育基地/农业部植物保护与生物技术重点开放实验室/浙江省植物病毒重点开放实验室

关键词： 水稻黑条矮缩病毒;非结构蛋白;原核表达

期刊名称： 中国水稻科学

ISSN： 1001-7216

年卷期： 2012 年 26 卷 01 期

页码： 9-15

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)基因组片段S7含有2个非重叠的阅读框,所编码的蛋白分别为p7a和p7b。根据RBSDV S7序列(EU111804)设计特异性引物分别扩增编码p7a和p7b蛋白的基因片段,并亚克隆至原核表达载体pET-32a(+)和pSBET上,再以大肠杆菌BL21(DE3)pLysS或BL21(DE3)pLysE为宿主菌进行高水平表达,利用纯化的蛋白免疫小鼠,制备了p7a和p7b蛋白的特异性抗血清。蛋白质印迹分析表明p7a和p7b蛋白均在水稻病株中表达,但p7a含量较为丰富,易于在病株中检测到,而p7b在病株中含量则很低;在病毒粒子中,两者均未检测到任何信号,表明两者均为RBSDV的非结构蛋白。

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