文献类型： 中文期刊

作者： 位战飞 ¹ ; 郭华 ¹ ; 李海龙 ¹ ; 郑卫卫 ¹ ; 王文文 ¹ ; 戴欢 ¹ ; 朱颖 ¹ ; 刘洋 ¹ ; 董忠典 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词： 半滑舌鳎;CD40基因;克隆;荧光定量;哈维氏弧菌

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2016 年 23 卷 05 期

页码： 1063-1072

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究通过RACE技术在半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)中克隆得到1个CD40同源基因。该基因c DNA全长为2098 bp,开放阅读框为1011 bp,可编码由336个氨基酸组成的蛋白质。推导得到的CD40氨基酸序列包含1个信号肽、1个跨膜结构区、2个N-糖基化位点以及含4个富含半胱氨酸的保守结构区。不同物种氨基酸序列同源分析结果显示,该基因与哺乳类、两栖类以及硬骨鱼类相似性为28%~47%,其中与硬骨鱼类相似性较高。系统进化分析结果显示,半滑舌鳎CD40与其他硬骨鱼类CD40聚类为一支,哺乳类与两栖类CD40聚类为另一支。荧光定量PCR结果显示,CD40在健康半滑舌鳎不同组织中均有表达,其中在鳃、肝和脾等组织中表达量较高,在肠、肌肉和皮肤中表达量较低,在脑和肾中微量表达。经哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染刺激后,与PBS处理的对照组相比,该基因m RNA在半滑舌鳎3个主要免疫组织(肝、脾和肾)中表达量均呈显著性升高,在肝中12 h到达峰值,在脾和肾中6 h达到峰值。上述结果表明CD40基因参与了半滑舌鳎抵抗哈维氏弧菌的免疫应答反应。