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草鱼TBK1基因荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 张林 1 ; 张浪 1 ; 周剑光 1 ; 甘金华 1 ; 张涛 1 ; 何力 1 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院长江水产研究所农业农村部淡水鱼类种质监督检验测试中心

关键词： 草鱼;TBK1基因;18S rRNA基因;荧光定量PCR;双标准曲线

期刊名称： 中国渔业质量与标准

ISSN： 2095-1833

年卷期： 2022 年 006 期

页码： 9-14

摘要： TANK结合激酶1（TANK-binding kinase 1,TBK1）基因在天然抗菌免疫中发挥重要作用，为研究该基因在草鱼（Ctenopharyngodon idella）抗病天然免疫中的表达水平，本研究根据已报道的草鱼TBK1基因（ciTBK1）序列，设计特异性引物2对，基于ciTBK1和18S rRNA双标准曲线建立了荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR）检测方法。结果表明，建立的标准曲线Ct（Cycle thrshold）值与模板浓度的对数呈现良好的线性关系（R~2均大于0.99）,建立的qRT-PCR检测方法能特异地定量检测ciTBK1基因，检测灵敏度可达50拷贝/μL,且组内及组间变异系数均小于5%。所建立的qRT-PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。[中国渔业质量与标准，2022,12（6）:09-14]

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