文献类型： 中文期刊
作者： 余波 1 ; 周思旋 1 ; 谭诗文 1 ; 徐景峨 1 ; 史开志 1 ; 杨莉 1 ;
作者机构： 1.贵州省畜牧兽医研究所
关键词： 猪细小病毒;VP2基因;SYBR Green Ⅰ荧光定量
期刊名称： 湖北农业科学
ISSN： 0439-8114
年卷期： 2015 年 54 卷 001 期
页码： 126-129,133
摘要： 根据GenBank中猪细小病毒VP2基因序列设计特异性的引物,PCR扩增获得猪细小病毒VP2基因片段,并克隆到pMD-18T载体上作为阳性标准品.通过对SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR反应条件的优化,建立了猪细小病毒的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR诊断方法,以此为基础研制出试剂盒.试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对PRV、PCV-2、E.coli、CSFV、PRRSV均无阳性信号扩增,可重复性好,测灵敏度可达1.0×101拷贝/μL.结果表明,研制的猪细小病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等优点,适合于猪细小病毒临床样品的检测.
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[1]猪细小病毒SYBR Green I荧光定量PCR诊断试剂盒的研制. 余波,周思旋,谭诗文,徐景峨,史开志,杨莉. 2015
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