文献类型： 中文期刊

作者： 谭爱萍 ¹ ; 邹为民 ² ; 赵飞 ² ; 姜兰 ² ; 陈信廉 ² ; 劳海华 ² ; 简清 ² ; 陆小萏 ² ; 罗理 ² ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所广东省水产动物免疫技术重点实验室

2.中国水产科学研究院珠江水产研究所广东省水产动物免疫技术重点实验室;广州市兴达动物药业有限公司

关键词： 锦鲤疱疹病毒;主要囊膜蛋白基因;序列分析;原核表达载体

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2008 年 15 卷 05 期

页码： 880-884

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了进一步研究锦鲤疱疹病毒主要囊膜蛋白(KHV-MEP)的功能及锦鲤疱疹病毒(KHV)的感染机制,根据KHV-MEP基因序列设计并合成1对引物,从自然感染KHV发病的锦鲤(Cyprinus carpio Koi)肝组织总DNA中扩增获得特异性基因片段。将所得基因片段克隆到pMD18-T Simple Vector载体中,获得重组质粒T-KMEP;酶切鉴定后进行序列测定,并采用氨基酸亲水性分析软件TMpred对其编码氨基酸序列进行分析;在对该片段所编码氨基酸可能抗原位点分析的基础上,进行PCR改造构建原核表达载体,获得重组表达载体pBV-KMEP1和pBV-KMEP2。所获得的基因片段大小为771bp,该基因片段与GenBank中已登录的KHV-MEP基因(AB178537)的同源性为100%,是一个完整的开放阅读框,所编码的蛋白由256个氨基酸组成,分子量为28.2kD,等电点(PI)为8.65。该序列含有4个跨膜区,可构成主要抗原决定簇。结果显示所获得的目的基因片段就是锦鲤主要囊膜蛋白全基因。