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大白菜非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的优化

文献类型: 中文期刊

作者: 梁宝萍 1 ; 原玉香 2 ; 朴凤植 1 ; 张晓伟 2 ; 蒋武生 2 ; 梁爽 3 ; 姚秋菊 2 ; 张强 2 ; 赵艳艳 2 ;

作者机构: 1.河南农业大学园艺学院

2.河南省农业科学院园艺研究所

3.郑州大学生物工程系

关键词: 非变性聚丙烯酰胺;聚合速度;贮存液;TEMED与APS配比

期刊名称: 河南农业科学

ISSN: 1004-3268

年卷期: 2012 年 41 卷 05 期

页码: 129-132+136

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的检测效果受到凝胶聚合速度、片段迁移率等多种因素影响。以大白菜为供试材料,研究比较了凝胶聚合速度及PCR产物在不同浓度凝胶上的检测效果。不同浓度的凝胶是由2种〔40%(19∶1)和30%(29∶1)〕贮存液分别配制的4种浓度(5%,7%,9%,11%)。结果表明,在4~30℃,凝胶聚合速度随温度的升高而加快;APS保持不变,不同温度下TEMED∶APS合适配比也不同:4℃(冬季)时,TEMED/APS的合适配比是1∶10,25℃(春秋)、30℃(夏季),选择1∶20的配比为宜;2种不同贮存液配制的相同浓度凝胶检测效果不同,30%(29∶1)优于40%(19∶1),由前者配制7%的凝胶上DNA片段分离效果好,带型清晰,分辨率高。

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