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非洲猪瘟病毒荧光定量PCR的建立及4种检测试剂盒的比较

文献类型: 中文期刊

作者: 肖琦 1 ; 蒋彩霞 2 ; 史慧 3 ; 赵霞玲 1 ; 钱雯娴 1 ; 朱家平 1 ; 张冯禧 1 ; 温立斌 1 ; 汪伟 1 ; 何孔旺 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

2.江苏省镇江市动物疫病预防控制中心

3.江苏省连云港市畜牧兽医站

关键词: 非洲猪瘟病毒;检测;荧光定量PCR;灵敏性;稳定性;敏感性

期刊名称: 江苏农业科学

ISSN: 1002-1302

年卷期: 2021 年 002 期

页码: 119-124

收录情况: 北大核心

摘要: 为评估目前常用商品化非洲猪瘟荧光定量PCR检测试剂盒,参考OIE推荐的非洲猪瘟病毒(ASFV)荧光定量PCR方法合成引物和探针,建立非洲猪瘟病毒qPCR检测方法(OIE-qPCR);并与市面4种ASFV检测试剂盒进行了比较。以人工合成的ASFV p72基因TA克隆重组质粒为阳性标准品,OIE-qPCR可以检测到10~102 copies;而4种ASFV荧光定量PCR检测试剂盒中,进口试剂盒TF-qPCR能检测到10 copies,进口试剂盒ID-qPCR和国产试剂盒QD-qPCR能检测到10~102 copies,而国产试剂盒LY-qPCR能检测到102 copies。对健康猪组织样及临床模拟样品的检测结果显示:OIE-qPCR与4种检测试剂盒之间的符合率为92.60%~99.03%。其中,阳性样品CT值的相关系数为0.988~0.997(Perason法),表明各试剂盒之间相关性良好;但在检测病毒核酸含量较低的样品时,各试剂盒结果之间存在一定差异,其中,TF-qPCR试剂盒显示更高的阳性检出率,ID-qPCR试剂盒和LY-qPCR试剂盒次之。本研究为临床选用非洲猪瘟病毒快速检测试剂盒提供了依据。

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