文献类型： 中文期刊
作者： 刘邓 1 ; 袁秀芳 1 ; 徐丽华 1 ; 牛登元 2 ; 王朝文 2 ; 王一成 1 ;
作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所
2.甘肃农业大学
关键词： 猪流行性腹泻病毒;猪传染性胃肠炎病毒;双重RT-PCR
期刊名称： 动物医学进展
ISSN： 1007-5038
年卷期： 2009 年 30 卷 10 期
页码： 1-5
收录情况： 北大核心
摘要： 根据GenBank发表的猪流行性腹泻病毒(PEDV)CV777株和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)Purdue P115株的基因序列,针对其基因保守区,设计1条共用的下游引物和2条各自病毒的上游引物,可特异扩增出大小分别为213 bp和546 bp目的条带。经过对TaqDNA聚合酶和Mg2+浓度、退火温度(Tm)等PCR反应条件的优化,最终确定该双重RT-PCR的最佳条件为TaqDNA聚合酶浓度为0.03 U/μL,Mg2+浓度为0.05 mmol/L,dNTP浓度为200μmol/L,Tm为51℃。特异性和敏感性检测结果显示,所建立的检测方法具有很好的特异性以及较高的敏感性。
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