文献类型： 中文期刊

作者： 于俊杰 ¹ ; 陈志谊 ¹ ; 胡建坤 ¹ ; 俞咪娜 ¹ ; 聂亚锋 ¹ ; 尹小乐 ¹ ; 刘永锋 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院植物保护研究所

关键词： 枯草芽孢杆菌;草酸脱羧酶;基因克隆;酶活性

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2012 年 28 卷 03 期

页码： 42-47

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为明确枯草芽孢杆菌生防菌株Bs-916的抑菌蛋白质Bacisubin的编码基因,并初步解析Bacisubin的抑菌机理,根据该蛋白质的部分序列设计简并引物,获得了编码基因的部分序列,参考基因组数据库克隆了Bacisubin基因全序列。将Bacisubin基因克隆至PET28a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中表达获得His标签融合蛋白质,并利用次甲基蓝-重铬酸钾法初步检测了该融合蛋白质的酶催化活性。克隆获得Bacisubin基因开放阅读框序列共1 161 bp,G+C含量为51.3%,可编码386个氨基酸,编码蛋白质与Bs-168菌株的草酸脱羧酶Yvrk蛋白质的氨基酸相似度为87%,与其他多种细菌和真菌的草酸脱羧酶的N端和C端Cupin活性中心区域和Mn2+结合区域高度保守。预测Bacisubin分子量为43 600,等电点为5.18,是较稳定的可溶性草酸脱羧酶,其催化最适pH为6.0左右,最适温度为30℃左右。说明枯草芽孢杆菌Bs-916的抑菌蛋白质Bacisubin为草酸脱羧酶,抑菌作用可能与其降解草酸的能力有关。