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玉米小斑病菌C小种毒素诱导玉米离体根冠细胞凋亡的检测

文献类型: 中文期刊

作者: 马春红 1 ; 李秀丽 1 ; 董文琦 2 ; 李运朝 1 ; 崔四平 1 ; 贾银锁 1 ; 王立安 3 ;

作者机构: 1.河北省农林科学院遗传生理研究所

2.河北省农林科学院科技处

3.河北师范大学生命科学学院

关键词: 玉米小斑病菌C小种;毒素;细胞凋亡;检测

期刊名称: 华中农业大学学报

ISSN: 1000-2421

年卷期: 2010 年 29 卷 02 期

页码: 138-142

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 将玉米同核异质体不育细胞质CB37及其正常保持系NB37的离体根冠细胞分为4组,其中3组分别用质量浓度50μg/mL、100μg/mL和150μg/mL的玉米小斑病菌C小种(HMC)毒素诱导,1组用pH6.5PBS诱导作为对照,诱导时间分别为1h、4h和7h。然后采用中性红与伊文思蓝染色、吖啶橙(AO)与溴化乙啶(EB)复染和Hoechst33258染色3种方法检测玉米根冠细胞的凋亡状况。结果表明:HMC毒素诱导玉米根冠细胞发生凋亡,并出现凋亡小体与染色体边集形态特征。中性红与伊文思蓝染色,只能检测出活细胞和死细胞,且在3种毒素浓度、3种处理时间下,CB37的根冠细胞死亡率均高于NB37;采用AO与EB复染方法,用150μg/mLHMC毒素处理7h时,CB37细胞凋亡率达到最高值70.2%,而NB37仅为36.7%;经Hoechst33258染色后,CB37用150μg/mLHMC毒素处理7h时达到最大凋亡率为74.5%,而NB37为30.7%。专效性HMC毒素对C细胞质敏感,在毒素伤害细胞致死过程中,C细胞质的细胞死亡率远高于N细胞质;在诱导细胞凋亡程序中,C细胞质的细胞凋亡率也远高于N细胞质,且其凋亡率随诱导质量浓度和诱导时间的增加而增加;AO、EB复染与Hoechst33258染色两者相比,细胞凋亡率接近,准确度均高,图像清晰,且费用相当,但前者可以区分早期和晚期凋亡细胞,而后者不能区分。

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