文献类型： 中文期刊

作者： 王玉 ¹ ; 彭吉星 ² ; 吴海燕 ² ; 郭萌萌 ² ; 佟蒙蒙 ² ; 谭志军 ³ ;

作者机构： 1.浙江大学海洋学院海洋生物研究所;中国水产科学研究院黄海水产研究所;舟山市疾病预防控制中心

2.;浙江大学海洋学院海洋生物研究所;中国水产科学研究院黄海水产研究所;舟山市疾病预防控制中心

3.;浙江大学海洋学院海洋生物研究所;中国水产科学研究院黄海水产研究所;舟山市疾病预防控制中心;

关键词： 扇贝毒素-2;鳍藻;高效液相色谱;萃取;制备

期刊名称： 海洋与湖沼

ISSN： 0029-814X

年卷期： 2018 年 03 期

页码： 568-576

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本文以渐尖鳍藻(Dinophysis acuminata)为实验原料,建立了基于高效液相色谱法(HPLC)的扇贝毒素-2(Pectenotoxin-2,PTX2)的制备方法。研究重点对鳍藻细胞的破碎、PTX2毒素的提取及HPLC纯化等三个步骤的方法进行筛选和优化。结果表明,反复冻融与超声波细胞破碎相结合可获得最大的细胞破碎率和毒素提取率,分别为99.2%和81.5%。采用四种有机试剂(甲醇、丙酮、乙醚、二氯甲烷)及三种固相萃取小柱(Solid Phase Extraction,SPE)(Oasis HLB SPE,Phenomenex Strata-X SPE,Sep-Pak C18 SPE)对PTX2毒素进行提取,其中乙醚-二氯甲烷的提取效率最高,达78.2%。在HPLC对PTX2毒素的纯化实验中发现,流动相的pH会影响毒素组分的分离,其中在碱性流动相(含6.7mmol/L氨水的水溶液和乙腈溶液,pH=10.94)条件下,PTX2的分离效果最佳,响应值最高。实验使用Phenomenex Kinetex C18(4.8mm×250mm,5μm)色谱柱,在上述碱性流动相条件下,分离得到纯度为93.2%的PTX2毒素。本研究选定的藻细胞破碎、PTX2毒素提取、及HPLC纯化方法简单快捷,高效易操作,为从大规模培养的鳍藻细胞中制备高纯度PTX2毒素提供了技术支持。