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水产品中庆大霉素直接竞争酶联免疫吸附测定法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 王强 1 ; 王旭峰 1 ; 赵东豪 1 ; 黄珂 1 ; 古小莉 1 ; 李刘冬 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院南海水产研究所农业部水产品加工重点实验室农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(广州)农业部渔业环境及水产品质量监督检验测试中心(广州)

关键词: 庆大霉素;酶联免疫吸附法;抗体;水产品;残留;检测

期刊名称: 中国渔业质量与标准

ISSN: 2095-1833

年卷期: 2017 年 7 卷 02 期

页码: 36-42

摘要: 建立了测定水产品中庆大霉素(GM)残留的直接竞争酶联免疫吸附测定法(dcELISA),为进一步开发商业化的ELISA试剂盒提供技术支持。通过碳二亚胺法和戊二醛法分别制备了免疫原GM-KLH和包被原GM-OVA,经动物免疫后获取的多克隆抗体与辣根过氧化物酶偶联制备酶标抗体GM-PAb-HRP。优化确立了dcELISA最佳检测条件:包被原质量浓度0.2μg/m L,GM-PAb-HRP稀释度1/3 200,抗体反应时间40 min,缓冲液为PBS(pH 8.0,10 mmol/L)。该方法的半抑制浓度(IC_(50))为0.99μg/L,定量检测线性范围为0.27~3.64μg/L。水产样品加标回收率为77.7%~104.5%,RSD为6.7%~13.2%,最低检测限为2.0μg/kg。该方法可用于水产品中庆大霉素残留的快速测定,为食品安全风险监测提供一种有效的技术手段。

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