文献类型： 中文期刊

作者： 张晓玲 ¹ ; 杨桥 ² ; 代俊 ² ; 顾潮江 ² ; 许振辉 ² ; 焦炳华 ² ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院东海水产研究所

2.中国水产科学研究院东海水产研究所;第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室;病毒学国家重点实验室,武汉大学生命科学学院;哥伦比亚大学病理与细胞生物学系

关键词： H5N1禽流感病毒;病毒感染;黑色素;谷胱甘肽;NF-κB途径

期刊名称： 中国生物化学与分子生物学报

ISSN： 1007-7626

年卷期： 2009 年 25 卷 04 期

页码： 364-372

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 我国是H5N1高致病性禽流感频发区.为筛选天然药物用于H5N1禽流感的防治并研究其抗病毒感染的作用机制,本研究选取黑色素及谷胱甘肽(GSH)为候选药物,通过Hoechst33258荧光染色,观察了禽流感病毒(AIV)感染后的细胞形态变化;细胞凋亡流式细胞术定量分析表明,H5N1AIV感染可诱导宿主狗肾上皮细胞(MDCK)凋亡,而黑色素及GSH对其具有显著抑制作用(P<0.01);当20μg/ml黑色素及10mmol/LGSH共同作用时,抑制率高达89%(P<0.01);采用MTT法检测,黑色素及GSH可增强AIV感染后的宿主细胞存活率;病毒血凝素(Ha)基因的RT-PCR检测结果表明,黑色素及GSH可显著降低AIV在宿主细胞内的增殖(P<0.01);一氧化氮(NO)毛细管电泳(CE)激光诱导荧光检测显示,黑色素及GSH均可显著降低病毒感染诱导宿主细胞内的NO释放量(P<0.05);RT-PCR技术结合ELISA方法,分别分析了病毒感染后宿主细胞的诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环氧化酶(cyclooxygenase-2,COX-2)及核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在mRNA和蛋白水平表达的差异.结果表明,黑色素及GSH可抑制病毒感染诱导的iNOS与COX-2的基因及蛋白的表达(P<0.05),并进而抑制NF-κB途径的激活(P<0.01),从而可有效抑制HNAIV感染.